请从土壤中分离分解尿素酶的细菌的有关问题

请从土壤中分离分解尿素酶的细菌的有关问题(一)
土壤中分解尿素的细菌的分离和计数习题和答案

2.2土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 习题

1．在培养基中加入尿素(惟一氮源)，以分离出能分解尿素的细菌，这种加入尿素的培养基在功能上属于( )

A．选择培养基 B．固体培养基 C．液体培养基 D．半固体培养基

2．实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触)，将平板置于37 ℃条件下恒温培养3天，结果如图所示。从实验结果分析，以下叙述不正确的是( ) ．

A．链霉素能阻止结核菌的生长

B．链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效

C．链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效

D．链霉素可以用于治疗伤寒病人

3．测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是( )

A．细菌个体小，真菌个体大 B．细菌易稀释，真菌不易稀释

C．细菌在土壤中数量比真菌多 D．随机的，没有原因

4．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是( )

A．未接种的选择培养基B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基

C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 D．接种了的选择培养基

5．在涂布平板操作时错误的是( )

A．将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红 B．取少量菌液滴加在培养基表面

C．将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃尽后，冷却8 s～10 s再用

D．涂布时可转动培养皿，使涂布均匀

6．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养能分解尿素的细菌后，指示剂的颜色是( )

A．蓝色 B．红色 C．黑色 D．棕色

7．在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时又能抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做( )

A．鉴别培养基 B．加富培养基 C．选择培养基 D．基础培养基

8．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是( )

①加尿素 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加琼脂

⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸盐 ⑧不加硝酸盐

A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．①③⑤⑧ D．①④⑥⑦

9．在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找，下列不属于厌氧细菌生．

存环境的是( )

A．土壤深层 B．人或动物体内寄生 C．真空 D．池塘淤泥

10．下列是关于检测土壤中细菌总数实验操作的叙述，其中错误的是( )

A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板

B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上

C．将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48小时

D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

11．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( )

A．以尿素为惟一氮源的培养基中加入二苯胺试剂B．以尿素为惟一氮源的培养基中加入酚红指示剂

C．以尿素为惟一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D．以尿素为惟一氮源的培养基中加入双缩脲试剂

12

．在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用氮源只含尿素的培养基，乙组实验

用氮源除尿素外还含硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作，培养与观察，则乙组实验属于( )

A．空白对照 B．标准对照 C．相互对照 D．条件对照

13．某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难以降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(“目的菌”)。实验的主要步骤如下。请分析回答问题：

(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选__________，这种培养基属于__________培养基。xkb1.com

(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的__________，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是__________。

(3)培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量__________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量__________。

(4)转为固体培养时，常采用__________的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

(5)若要研究“目的菌”的生长规律，可将单个菌落进行液体培养，采用__________的方法进行计数，以时间为横坐标，以________________________________________________________________________为纵坐标，绘制生长曲线。

(6)实验结束时，使用过的培养基应该进行__________处理后，才能倒掉。

14．某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混在一起。该同学设计下面的实验，分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。

(1)实验原理：圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培养条件下生长繁殖而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖。

(2)材料用具：(略)

(3)实验步骤

①制备两种培养基，将两种培养基各自分成两份，依次标号A、a和B、b。

②________________________________________________________________________，

并在25 ℃条件下培养__________天。

③分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌并分别接种到a、b培养基中，适宜条件下培养3～4天。

(4)请问答

①本实验中，配制的分离用的培养基成分特点：A、a是__________培养基，B、b是__________培养基，根据上述原理配制的培养基属于__________培养基。

②根据所需目的配制上述培养基时除营养要协调外还应注意

________________________________________________________________________。

③实验步骤中第③步的目的是

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

④圆褐固氮菌与酵母菌在结构上的主要差异为

________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。

⑤青霉素抑制圆褐固氮菌等细菌的生长繁殖，其作用机理是破坏或抑制其细胞壁的形成。请据此推测不影响酵母菌等真菌生长繁殖的原因是

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

2.2土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 习题答案

1.解析：选A。选择培养基是从功能上对培养基进行分类的，B、C、D三项所述的培养基是根据培养基的物理状态进行分类的。题述培养基能分离出以尿素为惟一氮源的细菌，故是一种选择培养基。

2. 解析：选D。从图中可以看出，这是含有链霉素的选择培养基，接种的三种细菌中，霍乱菌和结核菌都可以被杀灭，并且链霉素对结核菌杀灭的有效程度大于霍乱菌，而伤寒菌照常生长不受影响，所以选项D错。

3. 解析：选C，土壤中的微生物大约70%～90%是细菌，真菌的数量要比细菌少。样品的稀释度越高，在平板上生成的菌落数目就越少。在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在30～300之间，适于平板计数，所以细菌的稀释倍数要高于真菌的稀释倍数。

4．解析：选C。将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此，应选牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。对照遵循的是单一变量原则，所以与选择培养基一样接种、培养。

5. 解析：选A。涂布平板时，首先要对涂布器进行灭菌处理，方法是把沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上点燃，冷却后使用；然后把0.1毫升的菌液滴加到平板上，用涂布器涂布均匀。如果涂布器在酒精灯火焰上灼烧直到烧红，不经冷却，则涂布器的温度很高，在使用时就会杀死要接种的细菌。

6. 解析：选B。尿素被细菌分解形成碱性物质氨，在碱性环境下，酚红指示剂变红。

7. 解析：选C。基础培养基是含有一般微生物生长繁殖所需基本营养物质的培养基，例如牛肉膏蛋白胨培养基；加富培养基一般用来培养营养要求比较苛刻的异养型微生物；鉴别培养基是在培养基中加入某种特殊的化学物质，微生物的代谢产物能与该物质产生特定的化学反应，产生明显的特征变化，如出现某种特定颜色等，从而鉴别出微生物种类；选择培养基是在培养基中加入某种物质，促进需要的微生物生长、抑制不需要的微生物生长，从而选择出某种微生物。

8. 解析：选C。土壤中分解尿素的细菌能够合成脲酶，将尿素分解生成氨，利用尿素中的氮合成自身有机物。培养基中只加尿素，分解尿素的细菌能生长，其他微生物不能生长；分离微生物要用固体培养基；土壤中分解尿素的细菌属于异养微生物，需要加葡萄糖作为碳源。

9. 解析：选C。厌氧型微生物的生长繁殖不仅需要厌氧环境，但同时还需要生存所必需的各种营养物质，如碳源、氮源、水、无机盐等。真空环境只能提供无氧环境，却不能提供其他营养物质。

10. 解析：选D。本题考查的是土壤微生物总数的计数，所以培养所使用的培养基就应该是标准培养基，并要经过高压蒸汽灭菌处理；涂布时要对样本的水溶液进行稀释，一般选取104、105、106倍的土壤稀释液各0.1 mL进行涂布，为了检查平板培养基是否制备合格，要同时把一培养基接种少量无菌水，以作空白对照；培养一段时间后，如果平板上菌落个数在30～300之间，即可把该组所有平板的菌落计数，然后取其平均值，即可计算出土壤细菌的总数。而D项是菌落数在300以上，故D项错。

11. 解析：选B。尿素分解细菌的特点是可以产生脲酶，能把尿素分解为氨，而氨溶解于水后使溶液呈碱性，所以可以用酚红遇碱性变为红色的颜色反应来检测分解尿素细菌的存在。

12. 解析：选D。乙组和甲组实验仅是培养条件不同，因此为条件对照。

13. 解析：题干中首先说明了化合物A是有机物，后来在培养基中又增加了磷酸盐、镁盐以及微量元素，通过比较各培养瓶中化合物A的多少，选出“目的菌”，由此还可推断出“目的菌”所需碳源和氮源都来自化合物A，是异养型。获得“目的菌”后，再进行扩大培养，培养过程中及培养结束后注意灭菌。 答案：(1)“目的菌” 选择 (2)化合物A 异养需氧型 (3)减少 增加 (4)平板划线 (5)定期取样 “目的菌”数目的对数 (6)灭菌

14. 解析：本题综合考查微生物培养、分离以及有关的实验设计问题，圆褐固氮菌是自生固氮菌，在无氮源的培养基上可以生长，但是可以被青霉素杀灭；酵母菌是单细胞真菌，在无氮源培养基上不能生长，但是青霉素不能杀灭酵母菌，所以使用无氮源的培养基和加入青霉素的培养基都可以把它们分离出来。因为圆褐固氮菌是细菌，所以没有真正的细胞核，其细胞壁成分是肽聚糖；酵母菌是真核细胞，有真正的细胞核，细胞壁的成分也和细菌不同，主要是多聚糖，还有少量蛋白质和脂类。

答案：(3)②分别在A、B培养基上接种等量的混合的微生物 3～4

(4)①无氮 含青霉素的 选择 ②pH要适宜 ③分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌 ④圆褐固氮菌无成形的细胞核

⑤细菌细胞壁和真菌细胞壁的化学组成不同

请从土壤中分离分解尿素酶的细菌的有关问题(二)
分离土壤中分解尿素的细菌

土壤中分解尿素的细菌的分离与激素（学案4）

姓名 班级 小组 评定等级

【学习目标】1、概述微生物的筛选原理和计数方法；2、了解实验操作注意事项。

【学习重难点】重难点：实验设计和操作的严谨、规范性。

【课前复习】

1、筛选菌株的原理：

2、统计活菌数目的方法： 、

3、菌落特征有哪些？

4、一个菌落来源于 活菌；统计结果一般用 而不是

【本节知识网络】（思维导图形式）

【巩固训练】

1．以下关于菌落的叙述，正确的是（ ）。

A．一定是圆形 B．一定是黄色的

C．大小一定是相同的 D．观察到的单个菌落也有可能来自2个菌体的增殖

2.某同学在稀释倍数为106 的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234，那么每克样

品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml）( )

A. 2.34×108 B. 2.34×109 C. 234 D. 23.4

3.下列关于平菇（所需碳源为纤维素）培养的操作程序，正确的是（ ）。

A．配制牛肉膏蛋白胨培养基，接种，高压蒸汽灭菌，培养

B．配制牛肉膏蛋白胨培养基，高压蒸汽灭菌，接种，培养

C．配制棉子壳培养基，接种，高压蒸汽灭菌，培养

D．配制棉子壳培养基，高压蒸汽灭菌，接种，培养

4.在细菌的连续培养过程中，要以一定速度不断添加新的培养基，同

时以同样速度放出老的培养基。右图表示培养基的稀释率（培养基的

更新速率）与培养容器中营养物质浓度、细菌代时（细菌数目增加一

倍所需的时间）、细菌密度的关系。下列相关叙述不正确的是（ ）。

A．在稀释率很低的情况下，稀释率的增加会导致细菌密度增加

B．稀释率从A到B的变化过程中，细菌生长速率不断提高

C．稀释率超过B点后，营养物质浓度过高导致细菌死亡率增大，细菌密度降低

D．为持续高效地获得发酵产品，应将稀释率控制在B点附近

5．美国研究人员通过对大肠杆菌进行基因改造，可以使它将植物纤维逐渐转化为生物燃料。这种细菌不仅能以传统生物能源技术中使用的蔗糖为原料，还能将广泛存在于植物纤维中的半纤维素分解合成为燃料物质。若要将这种大肠杆菌分离出来，应将它们接种在（ ）。

A．不含氮源的培养基上 B．含有蛋白胨的固体培养基上

C．只含半纤维素而无其他碳源的选择培养基上 D．不含营养要素的培养基上

6.炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病，炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状，对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主

专一性，通过实验确诊。

（1）细菌培养：采集疑似患者的样本，分离

培养，获得可疑菌落。

（2）细菌鉴定：实验流程如图所

①对配制的液体培养基等需采取

______________灭菌；实验所用液体培养基的

碳源为“无机碳”或“有机碳”。

②挑选可疑菌落制片后，用__________________观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。

③接种可疑菌后，35 ℃培养24 h，液体培养基变浑浊，原因是__________________，对照组试管中应加入__________，与实验组同时培养6 h后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组______________（填“高”或“低”），则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。

④对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有______________________________。

7.微生物与人类关系密切。下表为培养某种微生物的培养基配方，请回答有关问题：

(1)从此培养基的配方来看，最适合培养下列哪种微生物？( )

A．酵母菌 B．硝化细菌 C．纤维素分解菌 D．大肠杆菌

(2)微生物培养的培养基可以分为液体培养基和________

，两种培养基的配方中一般都含有水、________、________和无机盐，培养基还需要满足微生物生长对________、________以及氧气的要求。

(3)稀释涂布平板法是微生物接种常用的方法之一，该法是将菌液进行________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布在琼脂固体培养基的表面，进行培养。稀释条件足够时，可形成由单个细胞形成的单个________，因此可用于微生物的__________________________。

(4)如果要进行土壤中分解尿素的细菌的分离，培养基中必须含有的成分是________，验证分解尿素的细菌是否存在，常用的方法是________________________。

(5)微生物接种的方法很多，在用平板划线法操作结束时，为什么仍需要灼烧接种环？___________________________ ________

请从土壤中分离分解尿素酶的细菌的有关问题(三)
分离土壤中分解尿酸的细菌 实验报告

分离土壤中分解尿素的细菌和计数 制作：邹霖

1.实验目的：从土壤中分离出能够分解尿素的细菌，计数

2.实验原理：A.培养基中加入唯一氮源--尿素，能分解尿素的细菌自身能够合成脲酶，能够分解利用尿素中的氮元素，从而能够生存繁殖；不能分解尿素的细菌的繁殖受到抑制，从而达到分离出土壤中能分解尿素的细菌的作用。B.使用酚红鉴定尿素是否被分解.CO(NH2)2分解产生NH3使溶液显碱性.如果尿素被分解，则酚红会显红色，C.分解原理.

CO(NH2)2+H2O==脲酶==CO2+NH3 D.稀释涂布平板法. 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释浓度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。E.计数菌落，一个或几个细菌可以繁殖为一个肉眼可见的菌落（计数结果低于实际细菌数）

3.提出问题：尿素分解后NH3的产生是否会影响实验？【请从土壤中分离分解尿素酶的细菌的有关问题】

4.做出假设：尿素分解后NH3的产生会影响实验。

5.实验材料用具：超净工作台、取样铲、试管、锥形瓶、恒温培养箱、培养皿、高压蒸汽灭菌锅、酒精灯、酒精、无菌水、地面以下3-8CM处的土壤、培养基A（磷酸二氢化钾 1.4g 磷酸氢化二钠 2.1g 七水合硫酸镁 0.2g 葡萄糖10g 尿素1g 琼脂 15g）培养基B（牛

肉膏蛋白胨培养基） 涂布器、干热灭菌箱、烧杯、胶头滴管

6.实验步骤：

1.对实验用具消毒灭菌；按配方称取上述物质，将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000ml。

2.配置好培养基后，将培养基A.B倒置都放入恒温培养箱中培养1d，取出后观察是否产生了菌落，若无，则继续下一步实验。若有，重做~~~~(>_<)~~~~

3.系列稀释：将分别盛有9ml水的5只试管和90ml水的1个锥形瓶灭菌，并按10~10的顺序编号 锥形瓶编号10。将10g符合条件的土壤放入锥形瓶中，震荡锥形瓶，用移液管吸取1ml菌液，注入标有10的试管中，用手轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀。以此类推，直到完成最后一只试管的稀释。（注意：移液管需要经过灭菌，操作时，试管口和移液管应在离火焰1~2cm处）

4.涂布平板：将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中，分别取10. 10 . 10中的少量菌液，分别各滴加到3个培养基A（总计9个）的表面，注明培养基种类，培养日期以及平板上培养样品的稀释程度，取少量无菌水滴加到1个培养基中作为空白对照组，取少量菌液滴加到培养基B中（判断选择培养基是否起到了选择作用），将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8-10S。用涂布器将菌液均匀的涂布在每个培养基表面（每次涂布前都必须用酒精灯灼烧）涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀。

5.将培养基倒置并放入恒温培养箱中培养1-2d

6.相同稀释程度的3个培养基统计其菌落数（30-300） 取平均值。

7.实验结果：1.空白对照组无菌落。

2.培养基B上的菌落数目多且种类多。

3.培养基A

8.实验结论：

请从土壤中分离分解尿素酶的细菌的有关问题(四)
答案

1、关于细胞结构、功能及其化合物的说法正确的是 （ ）

A．转运RNA、抗体、酶、载体蛋白发挥相应作用后，不能继续发挥作用的是抗体

B．同一生物的不同细胞会因细胞分化而导致细胞器在数量上有区别，但种类是相同的

C．蓝藻与绿藻都能进行光合作用，但二者在细胞结构上的主要区别是叶绿体的有无

D．蛋白质的合成不一定要在核糖体上进行，例如哺乳动物的成熟红细胞

答案：A

解析：不同的细胞功能不同时，细胞器的种类和数量也不同。蓝藻是原核生物，绿藻是真核

生物，二者在细胞结构上区别是有无细胞核（或核膜），蛋白质的合成一定是在核糖体

上的。

2．某草原生态系统一条食物链A→B→C中，各种群对能量的同化、利用、传递等数量关系

如下表。已知该生态系统受到的太阳辐射为150000百万千焦，但其中149875百万千焦

）

A．种群A、B、C构成了该生态系统的生物群落

B．种群B个体数量的变化是由于种群C对其有选择捕食的结果

C．能量从B到C的传递效率为12%

D．种群A的净同化量为59．5 百万千焦

答案：D

解析：该生态系统的生物群落包括生产者、消费者和分解者，A、B、C只有生产者和消费

者。种群B个体数量的变化是种群C和A共同作用结果，能量从B到C的传递效率为

2/14.

3．下列有关稳态与环境的叙述，正确的有 （ ）

①样方法和标志重捕法分别是调查群落中植物和动物丰富度的常用方法

②生长素类似物是人工合成的化学物质，不属于植物生长调节剂

③短期记忆可能与新突触的建立有关

④建立自然保护区能够提高K值，是保护大熊猫的根本措施

⑤“建立血糖调节的模型”实验中，模拟活动本身就是在构建动态的物理模型之后，再

根据活动中的体会构建概念模型

⑥长跑后肌肉酸痛是因为运动过程中骨骼肌细胞只进行无氧呼吸，积累了大量酸性物质

所致

A．④ B．④⑤ C．①③④ D．②③⑤⑥

答案：B

解析：样方法和标志重捕法分别是调查群落中植物和动物种群密度的常用方法，植物生长调

节剂是人工合成的化学物质如生长素类似物，保护大熊猫的根本措施是保护其生存空

间。短期记忆与新突触的建立无关，长期记忆与新突触的建立有关。长跑后肌肉酸痛因

为运动过程中骨骼肌细胞进行无氧呼吸,但还是以有氧呼吸为主。

4．2010年8月14日，在印度发现有些患者感染了一种新型“超级细菌”。这种细菌含有一

种叫NDM一1的基因，其对现有的绝大多数抗生素都“刀枪不入”，甚至对碳青霉烯类抗

生素也具有耐药性，而碳青霉烯类抗生素通常被认为是紧急治疗抗药性病症的最后方法。下

列有关这种细菌的说法，正确的是 （ ）

A．“超级细菌”的遗传物质一定是DNA，唯一的细胞器是核糖体

B．“超级细菌”的变异方式有基因突变和染色体变异，不进行有性生殖，所以没有基

因重组

C．“超级细菌”耐药性产生的根本原因是长期使用抗生素的结果

D．“超级细菌”的增殖方式是无丝分裂，不能进行有丝分裂

答案：A

解析：“超级细菌”的变异方式只有基因突变，不进行有性生殖，所以没有基因重组，没有

染色体就没有染色体变异。耐药性产生的根本原因是细菌基因突变的结果。无丝分裂和

有丝分裂都是真核生物分裂的方式。

5．下列关于生命科学发展史的有关叙述，不正确的是 （ ）

A．人们发现的第一种激素是由胰腺分泌的促胰液素

B．沃森和克里克研究DNA分子结构时，运用了建构物理模型的方法

C．验证光合作用释放的O2全部来自H2O的实验中应用了放射性同位素示踪技术

D．可以采用样方法调查某种昆虫卵的密度

答案：A

解析：人们发现的第一种激素是由小肠粘膜分泌的促胰液素。

6．答案：A ①M点时，植物叶肉细胞内进行呼吸作用，所以合成ATP的场所是线粒体、

细胞质基质。②若适当降低大棚温度，植物呼吸作用减弱，N点时光合速率等于呼吸速率将

会向左移动。③O点时，限制植物体的光合作用强度的主要因素是光照强度。④P点时，若

想提高作物产量可以适当补充光照，但绿光植物吸收最少，应增加红光或蓝紫光⑤Q点光照

强度时，限制植物光合作用强度的是二氧化碳，适当使用二氧化碳发生器可以提高作物产量

的一

个快照。

21．(8分)某些有毒物质能诱导真核细胞在分裂过程中产生微核。微核是由断裂的染色体

形成的椭圆形异常结构，游离于细胞核之外，光学显微镜下可见。某生物小组为了探究 香

烟焦油能否诱导微核产生，完成了如下实验：

第一步：萃取获得香烟中的焦油，用醋酸丙酯将其溶解后。再用蒸馏水稀释，配制成一系 列

浓度的焦油溶液。各取等量加入烧杯A、B、c、D中。将醋酸丙酯与蒸馏水混合液取等 量加

入烧杯E中。取等量蒸馏水加入烧杯F中。

第二步：将6个状况相同，幼根已培养至1cm的洋葱分别置于上述6个烧杯中培养较长

时间，然后从每个洋葱上随机取根尖数根制作临时装片。

镜检记录出现微核的细胞所占的比例(微核率)，计算每组平均值如下表：

请分析回答：

(1)为何洋葱在上述溶液中培养时间不可过短?_____。

(2)镜检时应选择位于根尖_____区，且处于细胞分裂一期的细胞。

(3)用洋葱根尖制作临时装片的一般步骤为_____。

(4)对ABCD四组而言，E组和F组哪组是对照组?_____。将E组与F组比较．作用是：

_______

该实验可得出什么结论? __________________ 。

的一个快照。

29．（8分）下图是两种细胞的亚显微结构示意图。请据图回答。

（1）图一细胞中参与抗体的合成和分泌并具膜结构的三种细胞器是 （填标号）。

（2）图一细胞中通过结构④进入细胞质的物质有 （举一例）。

（3）图二细胞与图一细胞相比，特有的两种生物膜结构是 （填标号）。

（4）图二细胞构成的组织是否适合做为还原糖鉴定的材料？ ，主要原

因是 。

（5）下面是观察图一细胞显微结构的操作步骤。

制临时装片：取一洁净的载玻片，中央滴一滴清水将图一细胞组织置于水滴中，盖上盖

玻片；

低倍显微镜下观察：将装片置于载物台上，通过调节反光镜、光圈、粗准焦螺旋、细准

焦螺旋及载玻片，找到细胞，并观察细胞结构；

高倍镜下观察：将低倍镜下观察的细胞移至视野中央，转换高倍镜，调节视野亮度，观

察细胞结构。【请从土壤中分离分解尿素酶的细菌的有关问题】

上述实验过程中存在两个错误，正确的操作应该是① ；

② 。

29．（8分）

（1）③⑤⑦ （2）mRNA （3）②⑧

（4）不能 图二细胞有叶绿体，不易观察到砖红色沉淀（2分）

（5）载玻片中央滴一滴相应动物的生理盐水 转换高倍镜后应调节细准焦螺

E:\理综 2011.03.28\山东青岛市2011年高三第一次统一模拟考试理综.doc 的一个快照。

31．（15分）以下是有关生物遗传变异的相关问题，请结合所学的知识分析回答：

Ⅰ．玉米是雌雄同株异花植物，有宽叶和窄叶，抗病和不抗病等性状。已知宽叶（A）

对窄叶（a）为显性，在苗期便能识别出来，并且杂交种（Aa）所结果实与纯合品种相

比表现为高产。某农场在培育杂交种时，将纯种宽叶玉米和纯种窄叶玉米进行了间行种

植，但由于错过了人工授粉的时机，结果导致大面积自然授粉。

（1）按照上述栽种方式，F1植株的基因型有 种。

（2）如果用上述自然授粉收获的种子用于第二年种植，预计收成将比单独种植杂交种减

产8%，因此到了收获季节，应收集 （宽叶、窄叶）植株的种子，第二年

播种后，在幼苗期选择 （宽叶、窄叶）植株栽种，才能保证产量不下降。

（3）玉米花叶病由花叶病毒引起，苗期出现黄绿相间条纹状叶。已知抗花叶病（b）为

隐性。现有纯种宽叶不抗病与纯种窄叶抗病两品种玉米，要获得高产且抗花叶病的

品种，可用两纯合亲本进行 ，得到F1，再用F1进行 ，即能在较短时间

内获得所需品种植株，其基因型是 。选出该玉米植株的简要过

程

是 。

（4） 如果玉米抗花叶病毒的基因与易感花叶病毒基因的转录产物相比，只有一个密码

子的碱基序列不同，导致翻译到mRNA的该位点时蛋白质合成提前终止，其根本

原因是基因中碱基对的 造成的。

Ⅱ．小鼠繁殖力强，也常被用作遗传研究的材料动物。

（1）一对黑色鼠与白色鼠杂交，F1均为黑色鼠，F1中黑色鼠个体自由交配，F2出现黑

色鼠：灰色鼠：白色鼠为9：3：4，若让F2中的灰色鼠与白色鼠杂交，子代中纯合

灰色鼠的比例是 。

（2）已知小鼠的一种隐性性状由基因d控制，但不知基因d是位于常染色体上，还是位

于X染色体上（不考虑同源区段）。可通过统计具有该隐性性状小鼠的 初

步确定该基因的位置。

（3）若控制该性状的D、d基因位于X染色体上，其中一个基因纯合时能使胚胎致死（注：

DdXY，XY等均视为纯合子）。一对小鼠杂交，若F1代雌鼠仅有一种表现型，则

致死基因是 ，F1代雌鼠的基因型是 。

（4）在一个区域的小鼠群体中发现某一性状出现的频率增加，这很可能是由于 。

31．（15分）（除特殊标记外，其余每空1分）

Ⅰ．（1）3

（2）窄叶 宽叶

（3）杂交 测交 Aabb 将测交后代种子全部种下，在培养过程中用花叶病毒

进行筛选（1分），在苗期选出正常宽叶植株（1分）

（4）替换（1分）

Ⅱ．（1）0

（2）性别比例（数量）（1分）

（3）XD或Xd

XdXd（致死基因为XD）； XDXD或XDXD、XDXd或XDXd（致死基因为Xd,答出前两

种即可得分） （2分）

（4）该性状对环境具有很强的适应性

32．（8分,每空1分）

如图是生态系统碳循环示意图，其中A、B、C、D是系统内各生物成分。请分析回答：

（1）在物质循环过程中，同时伴随着 。

若A增加100 kg，则最多需要C kg。

（2）A的同化量少于D的同化量的主要原因是：

① ；

② 。

（3）在生态系统中，生物因受生活条件改变的影响而发生适应性变异，这种变异属于由

环境引起的表现型的定向变异，这种变异不能遗传给后代。请依据“中心法则”的

观点进行解释【请从土壤中分离分解尿素酶的细菌的有关问题】

（4）目前，地球大气中的二氧化碳浓度有升高的趋势，其根本原因是①

② 。

（5）春天,牧草返青时,食草动物纷至沓来．这体现了生态系统 的功能．

32．（1）能量流动 1 0000 （2）①D的自身能量消耗 ②D未被A全部吸收

（3）由中心法则可知，遗传信息是由DNA传递给蛋白质的，而不是由蛋白质传给DNA

（4）①植被的严重破坏 ②化学燃料的大量燃烧

（5）信息传递

的一个快照。

39．（15分）下图表示利用基因工程培育抗虫棉过程的汞意图。请据图回答下列有关问题：

（1）分离[①]操作所用目的基因主要有两条途径：一条是条是 。完成[①]操作所用的工具酶是 。

（2）为了完成[②-j操作，经常借鉴土壤农杆菌侵染细胞的途径，这时需要用特定化学

物质处理细菌，目的是 。

（3）[③]操作可以快速得到大量棉植株，其所用技术的原理是。

为了检验目的基因是否导入，在进行[③]操作时需配置合适的培养基，其中除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入 。

（4）在做抗虫棉试验时，已经检测出棉的植株中含有抗虫基因，但让棉铃虫食用棉的叶

片时，棉铃虫并没有被杀死，这说明________。为此，科学家对棉植株中的抗虫基因进行了修饰，结果食用了棉叶的棉铃虫中毒死亡了，从变异类型分析，这种对抗虫基因的修饰属于______。

39．（ 16分，每空2分）

（1）从供体细胞的DNA中直接分离基因 人工合成基因 （以上两答案位置可互换） 限制性内切酶和DNA连接酶

（2）增大土壤农杆菌细胞壁的通透性

（3）细胞全能性 四环素

（4）抗虫基因在棉植株中没有表达 基因突变（1分）

34．（15分）【生物—生物技术实践专题】

尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题， 请分析回答：

（1）下图是利用法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步到培养基

的表面。

（2）如果要对培养的菌落进行纯化，在培养基上划线操作中，操作的第一步及每次划线

之前都要灼烧接种环，目的是对接种环进行 。

（3

请从土壤中分离分解尿素酶的细菌的有关问题(五)
第6课时 土壤中分解尿素细菌的分离与计数

第6课时 土壤中分解尿素细菌的分离与计数

目标导航 1.研究培养基对微生物的选择作用。2.进行微生物数量的测定。

一、研究思路 1．筛选菌株

(1)实验室中微生物筛选的原理

人为提供有利于________________生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时________或________其他微生物生长。

(2)选择培养基

在微生物学中，将允许__________种类的微生物生长，同时________或________其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。

(3)分离分解尿素的细菌的选择培养基

①在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是____________，提供氮源的是________，琼脂的作用是凝固剂。

②该培养基对微生物具有选择作用。其选择机制是________________________________才能在该培养基上生长。

③土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们体内能合成________，将尿素分解的反应式是________________________________________________________。

Taq细菌能忍受93℃左右的高温，是在美国黄石国家公园的一个热泉中发现的，这说明，在寻找目的菌株时，要根据____________________________________________。

2．统计菌落数目的方法

(1)稀释涂布平板法(也叫活菌计数法)

①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的____________，通过统计平板上的________，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

②操作

第一，设置重复组，增强实验的说服力与准确性。将待测样品经一系列10倍稀释，然后选择________稀释度的菌液，分别取0.1 mL接种到已制备好的平板上，然后用无菌涂布器将菌液涂布整个平板表面，放在适宜的温度下培养并计算菌落数。为使结果接近真实值，可将同一稀释度涂布到三个或三个以上的平板上，培养并计算出__________。

第二，为了保证结果准确，一般选择菌落数在________的平板进行计数，若设置的重复组中结果相差太远，意味着操作有误，需重新实验。

C

③计算公式：每克样品中的菌株数＝×M，其中C代表___________________________，

V

V代表________________________________(mL)，M代表____________。

(2)显微镜直接计数法

①原理：此法利用特定的____________或______________，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量，但不能区分细菌的死活。计数板是一块特制的载玻片，上面有一个特

22

定的面积1 mm和高0.1 mm的计数室，在1 mm的面积里又被划分成25个(或16个)中格，每个中格进一步划分成16个(或25个)小格，计数室由________个小格组成。

②操作：将稀释的样品滴在计数板上，盖上盖玻片，然后在显微镜下计数4～5个中格中的细菌数，并求出每个小格所含细菌的平均数，再按公式求出每毫升样品中所含的细菌数。

③计数公式：每毫升原液所含细菌数＝每小格平均细菌数×400×10 000×稀释倍数。 (3)设置重复和对照

①设置重复：培养过程中应设置重复组，同一稀释度下应涂布________个平板，才能增强实验的说服力与准确性。

②设置对照：实验中应设置对照，主要目的是________________________对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。如__________对照组，观察培养物中是否有杂菌污染；设置________培养基，观察选择培养基是否具有________作用。

二、实验设计 实验步骤

1．土壤取样：从肥沃、湿润的土壤中，用无菌小铁铲铲去表层土3 cm左右，迅速取土壤并装入____________密封或事先准备好的________中。

2．制备培养基：①制备________________培养基作为对照组，尿素为唯一氮源的培养基作为________，用来判断选择培养基是否具有____________。

37

②放宽稀释范围，如稀释倍数为10～10范围内的要分别涂布，而每个稀释度下需要______个选择培养基、________个牛肉膏蛋白胨培养基，因此需要15个选择培养基和5个牛肉膏蛋白胨培养基。

③两种培养基应各有一个作为________对照，此外还需准备8个灭菌的试管和1个灭菌的移液管。

3．样品的稀释与涂布平板：参考下面的实验流程示意图，将10 g土样加入盛有90 mL无菌生理盐水的锥形瓶中(锥形瓶体积为250 mL)，充分摇匀，吸取上清液1 mL，转移至盛有

773

________ mL生理盐水的无菌大试管依次等比稀释至10稀释度，并按照由10～10稀释度的

顺序分别吸取______mL进行平板涂布操作。按照浓度从低到高的顺序涂布平板，不必更换移液管。

说明：图中的1、2、3平板是____________，4为____________________作对照，判断选择培养基是否具筛选作用，还有两个空白对照，即不涂布稀释后菌液的选择培养基和牛肉膏蛋白胨培养基，验证培养基中是否____________。

4．将涂布好的培养皿放在30℃温度下培养，及时观察和记录。

5．挑选选择培养基上不同形态的菌落接入含____________培养基的斜面中，观察能否产生颜色反应。

6．细菌的计数

当菌落数目稳定时，选取菌落数在________的平板进行计数。在同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出____________，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。同时仔细观察所分离到的菌落，并记录菌落特征。

7．统计表格

，____________表现出________的菌落特征。

三、操作提示

1．取土样用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都要________。

2．应在________旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入________中，塞好棉塞。 3．在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在________旁操作。 4．实验时要对________做好标记。注明________________________________________等。 5．为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当________________。

在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的________将尿素分解成了________。氨会使培养基的碱性增强，________升高。因此，我们可以通过检测培养基____________来判断该化学反应是否发生。

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将________，这样，我们就可以准确地鉴定该种细菌能够分解尿素。

知识点一 研究思路

1

(1)在该培养基源和氮源的分别是____________________。

(2)按物理性质划分该培养基属于________培养基，理由是培养基中含有________________；该类培养基常用于微生物的______________________等。

(3)由于____________________________________________________________________，

所以该培养基只能用于能够合成________的微生物的培养。用此培养基培养土壤浸出液能够从土壤中筛选出________的细菌。

(4)在微生物学中，将_______________________________________________________ __________________的培养基，称作选择培养基。

2．广东省是我国甘蔗生产区之一。甘蔗是一种高光效的C4植物，单位面积产量很高，种植面积日益扩大，目前已成为南方地区燃料酒精生产的重要原料。利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗→榨汁(蔗糖)→酵母发酵→蒸馏→成品(燃料酒精)。

(1)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：

步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。

步骤2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意________________和____________，加琼脂后灭菌，制成固体平板。

步骤3：将紫外线照射后的菌液稀释涂布平板。

步骤4：根据________________________________________________________________，筛选出突变菌。

(2)上述步骤2、3和4的依据分别是___________________________________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

知识点二 实验设计

6

3．用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为10的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是( )

A．涂布了1个平板，统计的菌落数是230

B．涂布了2个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238

C．涂布了3个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163 D．涂布了3个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233 4．在本实验操作中对使用的平板和试管要进行标记，以下说法正确的是( ) A．对培养皿仅需注明培养基的种类即可 B．一般在使用之后进行标记

C．由于试管用的较多，只需对试管进行标记即可

D．标记的目的主要是为了防止实验中平板、试管等的混淆

一、选择题

1．在缺乏氮源的培养基上，大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出( )

A．乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌 B．固氮细菌、大肠杆菌、放线菌 C．固氮细菌、霉菌、放线菌

D．固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌 2．请选出下列正确的操作步骤( )

①土壤取样 ②称取10 g土壤，取出加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中 ③吸取0.1 mL

1234567

土壤溶液进行平板涂布 ④依次稀释至10、10、10、10、10、10、10稀释度

A．①→②→③→④ B．①→③→②→④ C．①→②→④→③

D．①→④→②→③

3．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是( ) A．筛选出能分解尿素的细菌 B．对分离的菌种作进一步鉴定 C．作细菌的营养成分

D．如指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素

4．下面对“从土壤中分离分解尿素的细菌过程中灭菌”的理解，不正确的是( ) A．防止杂菌污染 B．消灭全部微生物

C．稀释土壤溶液的过程中必须在火焰旁操作 D．灭菌必须在接种前进行

5．下列不属于菌种记数方法的是( ) A．平板划线法 B．稀释涂布平板法 C．显微镜检法 D．滤膜法

6．下列有关配制培养基的叙述中，正确的是( ) A．制作固体培养基必须加入琼脂 B．加入青霉素可得到乳酸菌 C．培养自生固氮菌不需要氮源 D．发酵工程一般用固体培养基

7．用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目。在某稀释浓度下某同学做了若干个平板并统计每个平板的菌落数，最接近样品中菌体数真实值的是( )

A．菌落数最多的平板 B．菌落数量最少的平板 C．菌落数量适中的平板

D．取若干个平板菌落数量的平均值

8．土壤中分解尿素的微生物所需氮源为( ) A．硝酸 B．氨 C．尿素 D．蛋白胨 二、简答题 9．在现代农业中，常在饲料中加入一定量的尿素去饲养牛等牲畜。因其有特殊的器官——瘤胃，在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物以尿素作唯一氮源。某一同学设计了如下实验，对能分解尿素的细菌进行分离和计数。

Ⅰ.取样：到屠宰场，在刚宰杀的牛的瘤胃中取样，将样品装入事先准备好的信封中密封。 Ⅱ.制备培养基：制备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基。将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数应明显多于选择培养基上的数目。由于初次实验，选择了一个较宽的稀释范围，并且每个稀释度下需要3个选择培养基，1个牛肉膏蛋白胨培养基。

Ⅲ.微生物的培养与观察：按稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布操作。将涂布好的培养皿放在30℃下培养，并且需要无氧条件。比较两种培养基中菌落的数量、形态等，并做好记录。挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含酚红指示剂的培养基中，观察是否产生颜色反应。

Ⅳ.细菌的计数：当菌落数目稳定时，选取平板计数。 请回答下列问题：

(1)制备牛肉膏蛋白胨培养基的目的是什么？

________________________________________________________________________。 (2)为什么每个稀释度下需要3个选择培养基？

________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)上述培养时，为什么需要无氧条件？

________________________________________________________________________。 (4)应用含酚红指示剂的培养基的目的是什么？结果会呈现出什么样的颜色反应？原理