大来杞菊地黄丸

总杞菊地黄丸定性鉴别和含量测定研究
大来杞菊地黄丸(一)

杞菊地黄丸中各药材的定性鉴别及含量测定

一、处方

枸杞子40g 菊花40g 熟地黄160g 酒萸肉 80g 牡丹皮60g 山药80g 茯苓60g 泽泻60g

二、制法

以上八位味，取酒萸肉、牡丹皮、山药粉碎成细粉;泽泻、茯苓加水煎煮两次，第一次3小时，第二次2小时，滤过，滤液合并浓缩至相对密度为1.30—1.35（60—80℃）的稠膏；熟地黄切片，加水煎煮三次，第一次3小时，第二次2小时，第三次1小时，滤过，滤液合并浓缩至相对浓度为1.30—1.35（60—80℃）的稠膏；枸杞子以45%乙醇作溶剂，剩余的酒萸肉和牡丹皮及菊花已70%乙醇作溶剂，浸渍24小时后分别进行渗漉，收集渗漉液，合并上述渗漉液，回收乙醇浓缩至相对浓度为1.30—1.35（60—80℃）的稠膏；与上述细粉与稠膏混匀，制成浓缩丸，干燥，打光，即得。

三、性状

本品为棕色至棕黑色的浓缩丸，微甜而酸。

四、各药材的定性鉴别及含量测定

1、枸杞子

定性鉴别研究

实验仪器：冷凝管3个，圆底烧瓶3个，离心管6个，硅胶G薄层板，分液漏斗1个 实验试剂：乙酸乙酯，甲醇，甜菜碱对照品，甲苯

薄层板：硅胶G薄层板

展开剂：甲苯-乙酸乙酯-甲酸（15:2:1)的上层溶液

供试品溶液的制备方法：

取本品15g，研碎，加水100ml，加热回流30分钟3次，放冷，离心，取上清液，用乙酸乙酯50ml振摇提取3次，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液 。

对照药材溶液的制备：

取枸杞子对照药材0.5g，加水50ml，加热回流30分钟3次，放冷，离心，取上清液，用乙酸乙酯30ml振摇提取3次乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解 ，作为对照药材溶液。

对照品溶液制备：

取甜菜碱对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液。

阴性对照溶液的制备：

取阴性样品（缺枸杞子药材的样品），按照供试品溶液制备的条件制备样品，得阴性对照溶液。

操作方法：

照薄层色谱法（通则0502)试验，吸取上述两种溶液各10微升，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（15:2:1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

2、山药

定性鉴别研究

实验仪器：冷凝管1个，圆底烧瓶1个，分液漏斗1个，蒸发皿1个，硅胶G薄层板2个，离心管2个

实验试剂：95%乙醇，乙酸乙酯，二氯甲烷，甲醇，浓氨试液，氯仿，10%磷钼酸乙醇溶液，香兰素硫酸溶液

薄层板：硅胶G薄层板

展开剂：乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液（9：1：0.5）；氯仿:甲醇:水（64:50:10）

显色剂：10%磷钼酸乙醇溶液；香兰素硫酸溶液

供试品溶液的制备：

取本品8粒研碎，加二氯甲烷30ml，加热回流2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加二氯甲烷1ml使溶解，作为对照药材溶液。

对照药材溶液的制备：

取山药对照药材5g，加二氯甲烷30ml，加热回流2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加二氯甲烷1ml使溶解，作为对照药材溶液。

操作方法（薄层色谱法）

吸取上述2种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液（9：1：0.5）或氯仿:甲醇:水（64:50:10）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以显色剂：10%磷钼酸乙醇溶液或香兰素硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。【大来杞菊地黄丸】

3、茯苓

定性鉴别研究

实验仪器：冷凝管1个，圆底烧瓶1个，分液漏斗1个，硅胶G薄层板2个

实验试剂：甲醇，乙醇，乙酸乙酯，乙醚，10%硫酸乙醇溶液，2%香草醛酸溶液-乙醇（4: 1)，三氯甲烷，茯苓多糖对照品。

薄层板：硅胶G板

展开剂：三氯甲烷-甲醇（3 : 1)或正丁醇-冰乙酸-水（4:1:5上层）或甲苯-乙酸乙酯-甲酸（20:5:0.5）

显色剂：10%硫酸乙醇溶液或2%香草醛酸溶液-乙醇（4: 1)混合溶液

供试品溶液的制备：

取本品杞菊地黄丸（浓缩丸）15g，研碎，加水100mL，加热回流30分钟，放冷，离心，取上清夜，用乙酸乙酯50mL振摇提取3次，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。

对照品溶液的制备：

取茯苓多糖加甲醇溶液1ml制成对照品溶液。

阴性对照品溶液的制备：

取阴性样品（缺茯苓药材的样品），按照供试品溶液制备的条件制备样品，得阴性对照溶液。

对照药材溶液的制备；

取茯苓对照药材1g，加乙醚50ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，制成对照药材溶液。

操作方法：

照薄层色谱法（通则0502)试验，吸取上述供试品溶液,对照药材溶液,阴性对照液，分别点于同一块硅胶G板上，以三氯甲烷-甲醇（3 : 1)或正丁醇-冰乙酸-水（4:1:5上层）或甲苯-乙酸乙酯-甲酸（20:5:0.5）或为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液或2%香草醛酸溶液-乙醇（4: 1)混合溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，在紫外光(365nm)下检视。

4、泽泻

定性鉴别研究

实验仪器: 冷凝管3个、圆底烧瓶3个、硅胶G薄层板2个、离心管2个

实验试剂: 乙酸乙酯、乙醇、乙醚、丙酮，环己烷，石油醚，5%硅钨酸乙醇溶液， 薄层板: 硅胶G薄层板

展开剂: 环己烷-乙酸乙酯(1 : 1)或石油醚-乙酸乙酯（3:1）或三氯甲烷-丙酮（3:1） 显色剂: 5%硅钨酸乙醇溶液

供试品溶液的制备:

方法1 取本品杞菊地黄丸（浓缩丸）15g,加水100ml,加热回流30分钟3次，放冷，离心，取上清液，用乙酸乙酯50ml振摇提取，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

方法2 取本品杞菊地黄丸（浓缩丸）6g，研碎，加乙醚40ml,加热回流1小时3次，滤过，滤液挥去乙醚，残渣加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。

方法3 取本品杞菊地黄丸(浓缩丸)3g,研细，加乙醇40ml,加热回流30分钟3次，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。【大来杞菊地黄丸】

对照药材溶液制备:

方法1 取泽泻对照药材0.5g,加水50ml,加热回流30分钟3次，放冷，离心，取上清液，用乙酸乙酯30ml振摇提取3次，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。

方法2 取泽泻对照药材1g,加乙醚40ml,加热回流1小时，滤过，滤液挥去乙醚，残渣加丙酮1ml使溶解，作为对照药材溶液。

方法3 取泽泻对照药材1g,加60%乙醇40ml,加热回流30分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。

阴性对照溶液的制备：

按处方比例称取除泽泻外的其他药材同法制成阴性对照品溶液。

操作方法:

照薄层色谱法（通则0502)试验，分别吸取上述供试品溶液,对照药材溶液,对照品溶液和阴性对照液各5 μL、3 μL、3 μL、5μL点于同一块硅胶G板上，以环己烷-乙酸乙酯(1 : 1)或石油醚-乙酸乙酯（3:1）或三氯甲烷-丙酮（3:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷5%硅钨酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。

5、熟地黄

定性鉴别研究

实验仪器：容量瓶，玻璃漏斗1个，分液漏斗1个，硅胶G薄层板2个

实验试剂:水饱和正丁醇，甲醇，毛蕊花糖苷对照品,0.1% 2 ,2 -二苯基-1-苦胼基无水乙醇溶液

薄层板：硅胶G薄层板

展开剂：乙酸乙酯-甲醇-甲酸(16 : 0. 5 : 2)

显色剂：0.1% 2 ,2 -二苯基-1-苦胼基无水乙醇溶液

供试品溶液的制备：

取本品（以下“本品”均指：杞菊地黄丸，2010版药典中规定每8丸相当于饮片3g）8粒，研碎，加80%甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过,滤液蒸干，残渣加水5ml使溶解，用水饱和正丁醇振摇提取4 次 ，每次10ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。

对照药材溶液的制备：

取熟地黄药材粉末lg ,同法制成对照药材溶液。

对照品溶液制备：

取毛蕊花糖苷对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液。

阴性对照溶液的制备：

取阴性样品（缺熟地黄药材的样品），按照供试品溶液制备的条件制备样品，得阴性对照溶液。

操作方法：

照薄层色谱法(通则 0502)试验 ，吸取供试品溶液5^1,对照品溶液2pl，分别点于同一硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-甲醇-甲酸(16:0.5:2)为展开剂，展开，取出，晾干，用0.1%的2,2 -二苯基-1-苦胼基无水乙醇溶液浸渍,晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的颜色斑点。

6、牡丹皮

定性鉴别研究

实验仪器：冷凝管3个，圆底烧瓶3个，硅胶G薄层板2个，玻璃漏斗1个

杞菊地黄丸说明书
大来杞菊地黄丸(二)

甲类

杞菊地黄丸说明书

请仔细阅读说明书并按说明使用或在药师指导下购买和使用

【药品名称】

品 名 杞菊地黄丸

汉语拼音 Qiju Dihuang Wan

【成 份】枸杞子、菊花、熟地黄、山茱萸（制）、牡丹皮、山药、茯苓、泽泻。辅料为

蜂蜜。

【性 状】本品为黑褐色的大蜜丸；味甜、微酸。

【功能主治】滋肾养肝。用于肝肾阴亏，眩晕耳鸣，羞明畏光，迎风流泪，视物昏花。

【规 格】大蜜丸每丸重9克

【用法用量】口服。大蜜丸一次1丸，一日2次。

【不良反应】尚不明确

【禁 忌】尚不明确

【注意事项】

1.忌不易消化食物。

2.感冒发热病人不宜服用。

3.有高血压、心脏病、肝病、糖尿病、肾病等慢性病严重者应在医师指导下服用。

4.儿童、孕妇、哺乳期妇女应在医师指导下服用。

5.服药4周症状无缓解，应去医院就诊。

6.对本品过敏者禁用，过敏体质者慎用。

7.本品性状发生改变时禁止使用。

8.儿童必须在成人监护下使用。

9.请将本品放在儿童不能接触的地方。

10.如正在使用其他药品，使用本品前请咨询医师或药师。

【药物相互作用】如与其他药物同时使用可能会发生药物相互作用，详情请咨询医师或药师。

【贮 藏】密封。

【包 装】铝塑封装，9克×10丸/盒。

【有 效 期】24个月

【执行标准】《中国药典》2005年版一部

【批准文号】国药准字Z14020424

【说明书修订日期】

【生产企业】

企业名称：山西万辉制药有限公司

生产地址：山西省万荣县工业园区

邮政编码：044200

电话号码：0359-8788588

传真号码：0359-8788577

备注：列入基本药物目录，列入医保药品【大来杞菊地黄丸】

如有问题可与生产企业直接联系。

杞菊地黄丸(浓缩丸)的质量分析
大来杞菊地黄丸(三)

杞菊地黄丸（浓缩丸）的质量分析

实验仪器：锥形瓶、5ml量瓶、50ml量瓶、量筒、高效液相色谱仪、UV 2101P C紫外可见分光光度计、超声波振荡仪、紫外二极管阵列检测器、0. 45μm 微孔滤膜、紫外灯

实验试剂：甲醇、甲酸、甲苯、乙醚、乙腈、乙酸乙酯、丙酮、二氯甲烷、浓氨试液、重蒸馏水 ( 临用前制备)、冰醋酸、环己烷 、水饱和正丁醇、0.1%磷酸溶液、0.3%磷酸溶液、盐酸盐 5%三氯化铁乙醇溶液、5% 硅钨酸乙醇溶液、0.1%的2 ,2 -二苯基-1-苦肼基无水乙醇溶液、10%硫酸乙醇溶液、三氯化铝试液、10%磷钼酸乙醇溶液、2%香草醛硫酸乙醇溶液、十八烷基硅烷键合硅胶、中性氧化铝、PhenomenexC 18、 硅胶G薄层板、硅胶H 薄层板、聚酰胺薄膜、

实验样品：马钱苷对照品、丹皮酚对照品、知柏地黄丸(浓缩丸)、缺牡丹皮的杞菊地黄丸( 浓缩丸)、23-乙酰泽泻醇B对照品、毛蕊花糖苷对照品、熊果酸对照品、绿原酸对照品、枸杞子对照药材、菊花对照药材、落新妇苷对照品、山药对照药材、

一、酒萸肉和牡丹皮的含量测定

（1） 酒萸肉 （酒萸肉又叫山茱萸,本品主要使用为山茱萸科植物山茱萸的干燥成熟果肉 ，酒萸肉提取物中主要含莫诺苷、马钱苷等成分。）

方法1 照高效液相色谱法（2015年版药典一部附录ⅥD）测定

1色谱条件与系统适用性试验

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇—乙腈—0.1%磷酸溶液

（5：9：86）为流动相；检测波长为236nm。理论板数按马钱苷峰计算应不低于4000。

2对照品溶液的制备

取马钱苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1ml含40μg的溶液，即得。

3供试品溶液的制备

取本品适量，研碎，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，加在中性氧化铝柱（100～200目，4g，内径为1cm）上，用40%甲醇50ml洗脱，收集流出液与洗脱液，蒸干，残渣用50%甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

4测定法

分别精密吸取对照品溶液10μl与供试品溶液5～10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每1g含酒萸肉以马钱苷（C17H26O10）计，不得少于1.11mg。

方法2 RP -HP L C法对杞菊地黄丸( 浓缩丸) 中马钱苷进行含量测定

1、色谱条件

色谱柱: Di a mo n s i l -C 18( 250 mm×4. 6 mm, 5 μm) ; 流动相: 乙腈- 甲醇-0. 1%磷酸溶液( 10∶ 5∶ 85)，（流动相对样品测定影响较大

建议尝试四氢呋喃-乙腈-甲醇(1∶ 8∶4)- 0. 05% 磷酸溶液比较）; 流速: 1 mL/mi n ,检测波长: 236 n m, 柱温: 室温（ 柱温仅对保留时间有影响， 对样品分离无影响， 考虑到出峰时间，有的选择柱温为 40 ℃ ，与 2010年版《中国药典》 一部一致。） 理论板数以马钱苷峰计算,不低于 4 000。

2 、线性范围

2.1测定波长的选择 取马钱苷对照品溶液， 在含量测定条件下， 以 HPLC-DAD 法进行紫外光谱全波长扫描测定， 得到紫外吸收光谱图， 最大吸收波长为 238 nm，参考《中国药典》 2015年版一部明目地黄丸酒萸肉含量测定项 下 的 检 测 波 长， 最 后 确 定 测 定 波 长 为236nm

2.2精密称取马钱苷对照品 12. 42 mg , 置 50 mL量瓶中, 加甲醇溶解并稀释至刻度, 摇匀, 作为对照品储备液, 分别吸取对照品储备液 1, 3, 5, 7, 10 ml置 50 ml量瓶中, 加 85%甲醇至刻度, 分别进样 20 μL , 在236nm 测定其峰面积, 以峰面积为纵坐标, 对照品进样量为横坐标, 绘制标准曲线。 求回归方程

（参考结果：Y=1 033 962. 149X+3 383. 116, R=0. 999 6。试验 表明, 进样量在 0. 090 0 ～ 0. 900 μg范围内, 马钱苷峰面积与进样量有良好线性关系。）

2.3重复性试验

分别精密称取同一批号样品 6份, 用 6个测定结果进行评价。按样品测定项下的方法进行测定。（参考结果其平均含量为1. 17 mg /g , R

S D为 1. 1%, 表明重复性较好。）

2.4稳定性试验

考察对照品溶液、供试品溶液的稳定性。精密吸取对照品溶液、供试品溶液 10 μL , 分别在制备后 0, 2, 4, 8 h按样品测定项下的方法进行峰面积测定。（参考结果： 计算峰面积, RS D分别为0. 7%、0. 6%, 表明稳定性较好。）

2.5加样回收率试验

精密称取同一批号样品 6 份, 用 6 个测定结果进行评价。 精密加入马钱苷对照品溶液一定量, 按样品测定项下的供试品溶液制备方法进行制备、测定, 计算回收率。

2.6专属性试验

阴性对照样品除山茱萸外 , 其它七味药按生产工艺制成。阴性对照溶液按供试品溶液制备方法制得 , 按样品测定项下方法进行测定 。

2.7样品测定

取本品适量 , 研碎 , 取约 1g , 用 8 5%甲醇 20m L 分 3次(每次 15 m i n ) 超声振荡提取, 滤过,弃去滤液,合并滤渣, 精密称定 , 置具塞锥形瓶中, 精密加入85%甲醇50 mL , 密塞 ,称定重量 ,加热回流 1 h , 放冷, 再称定重量,用85%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过, 取续滤液 , 作为供试品溶液,每次进样 20 μ L 。

（参考结论：通过改变其组成 , 发现在流动相乙腈 - 甲醇 -0. 1%磷酸溶液 (10∶ 5∶ 85) ,马钱苷峰与其它成分有较好的分离,保留时间适中 , 效果良好。85%的甲醇溶剂中马钱苷含量最高。）

（2）牡丹皮

方法1 牡丹皮薄层层析

取本品粉末5g ,加乙醚,滤过,滤液挥干,残渣加丙酮 1ml溶解作为供试品溶液。同法制备阴性对照溶液。另取丹皮酚对照品,加丙酮制成每1ml含1 mg的溶液,作为对照品溶液,吸取上述三种溶液各10μl ,分别点于同一硅胶 G 薄层板上 ,以环己烷 -醋酸乙酯( 3 : 1) 为展开剂,展开,取出,晾干,喷以盐酸盐 5%三氯化铁乙醇溶液 ,加热至斑

点显色清晰。在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。 方法2 现用高效液相色谱法测定

1条件

用 C 18柱 ,流动相为甲醇 - 水 ( 55: 45) , 检测波长为 274n m, 流速为 1. 0 ml /mi n , 柱温 : 30℃。结果丹皮酚进样量在 0. 7674μg～

5. 116μg 范围内线性关系良好 ( r =0. 9999) , 平均加样回收率为 103. 3%(RS D=0. 9%)。

2 方法与结果

2. 1 色谱条件

色谱柱为 Di a mo n s i lC 18 5μ m( 200 mm×4. 6mm)色谱 柱; 流 动相 为甲 醇- 水 (55 ∶ 45) ;检测 波 长为274n m; 流速为 1. 0 ml /mi n ; 进样量为 20μl 。 柱温: 30℃。 理论板数按丹皮酚峰计算应不低于 5000。

2. 2 线性关系与考察

取丹皮酚对照品约 15 mg , 精密称定, 置 25 ml 量瓶中, 加甲醇溶

杞菊地黄丸的功效与作用
大来杞菊地黄丸(四)

杞菊地黄丸的功效与作用:杞菊地黄丸是滋痛养肝中成药，杞菊地黄丸的功效与作用是滋痛养肝，治疗眩晕耳鸣、羞明畏光、肝肾阴亏、迎风流泪、视物昏花，杞菊地黄丸的副作用很小，只是脾胃虚寒，大便稀溏者慎用杞菊地黄丸

杞菊地黄丸的功效与作用:
杞菊地黄丸是滋痛养肝中成药，杞菊地黄丸的功效与作用是滋痛养肝，治疗眩晕耳鸣、羞明畏光、肝肾阴亏、迎风流泪、视物昏花，杞菊地黄丸的副作用很小，只是脾胃虚寒，大便稀溏者慎用杞菊地黄丸。
杞菊地黄丸可增强免疫功能，抗衰老，改善肝脏脂肪代谢，促进肝细胞新生，预防脂肪肝发生，
成份:枸杞子、菊花、熟地黄、山茱萸(制)、牡丹皮、山药、茯苓、泽泻。
性状:本品为棕黑色的水蜜丸、黑褐色的小蜜丸或大蜜丸，味甜、微酸。杞菊地黄丸的功效与作用。
功效:滋痛养肝。
主治:用于肝肾阴亏，眩晕耳鸣，羞明畏光，迎风流泪，视物昏花。
用法用量:口服，水蜜丸一次6g，小蜜丸一次9g，大蜜丸一次1丸，一日2次。

杞菊地黄丸副作用:
杞菊地黄丸的副作用很小，只是脾胃虚寒，大便稀溏者慎用杞菊地黄丸。